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氟尿嘧啶缓释剂植入对人结直肠癌裸鼠移植瘤生长抑制的观察

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重庆医学 2 0 1 3年 9月第 4 2卷第 2 6期

氟尿嘧啶缓释剂植入对人结直肠癌裸鼠移植瘤生长抑制的观察 李弘,颜丽萍,石晓萍 (广西壮族自治区桂林市第二人民医院消化内科 5 4 1 0 0 1 ) 摘要:目的观察氟尿嘧啶缓释剂植入对人结直肠癌裸鼠移植瘤生长抑制效果及其对肿瘤细胞半胱氨酸天冬氨酸特异性

蛋白酶一 3 ( c a s p a s e一 3 )表达的影响。方法用人结直肠癌 L o V o细胞株建立 B AL B/ c裸鼠皮下移植瘤模型,并将其分为 4组:磷酸盐缓冲液( P B S )尾静脉注射组 ( A组)、 5一氟尿嘧啶 ( 5 - F U)尾静脉注射组 ( B组 )、 5 - F U瘤内注射组 ( C组 )、氟尿嘧啶缓释剂植入组 ( D组)。用药 1 5 d后记录肿瘤质量、瘤体体积,计算抑瘤率,瘤体 HE染色,采用免疫组化法检测 c a s p a s e - 3的表达。结果氟尿

嘧啶缓释剂能够显著抑制结直肠癌移植瘤的生长, D组与 A、 B、 c组肿瘤质量、体积比较差异均有统计学意义 ( P<0 . 0 5 );氟尿嘧啶缓释剂能上调 c a s p a s e - 3的表达, D组与 A、 B、 C组比较差异均有统计学意义( P< 0 . 0 5 )。结论氟尿嘧啶缓释剂比传统的氟尿 嘧啶更能有效抑制结直肠癌移植瘤的生长,并可上调 c a s p a s e - 3的表达,提示氟尿嘧啶可能通过凋亡途径介导肿瘤细胞的凋亡而发挥抗肿瘤作用,其确切的抑瘤效果值得在临床化疗中推广。 关键词:结直肠肿瘤;氟尿嘧啶缓释剂;半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶一 3 d o i: 1 0 . 3 9 6 9/ j . i s s n . 1 6 7卜8 3 4 8 . 2 0 1 3 . 2 6 . 0 0 2 文献标识码: A 文章编号: 1 6 7 1 - 8 3 4 8 ( 2 0 1 3 ) 2 6 - 3 0 8 4— 0 3

Obs e r v a t i on on g r o wt h i nh i b i t i o n o f s u s t a i ne d- r e l e a s e f l u o r o u r a c i l i m pl a nt a t i on i n nu de mi c e wi t h hu ma n c o l

o r e c t a l c a r c i no ma

Li H on g, Yan Li pi ng, Shi Xi ao pi ng

( De pa r t me n t o f Ga s t r o e n t e r o l o g y, Gu i l i n Mu n i c i p a l S e c o n d Pe o p l e s Ho s p i t a l, Gu i l i n, Gu a n g xi 5 4 1 0 0 1, Ch i n a )

Ab s t r a c t: 0b j e c t i v e To o b s e r v e t h e g r o wt h i n h i b i t i o n e f f e c t o f s u s t a i n e d— r e l e a s e f l u o r o u r a c i l i mp l a n t a t i o n i n n u d e mi c e wi t h h u ma n c o l o r e c t a l c a r c i n o ma a n d t o d i s c u s s i t s i n f l u e n c e o n c a s p a s e一 3 e x p r e s s i o n . Me t h o d s Th e c o l o r e c t a l c a r c i n o ma s u b c u t a n e o u s

t r a n s p l a n t e d mo d e l wi t h Lo Vo c e l l i n BALB/ e n u d e mi c e wa s e s t a b l i s h e d a n d d i v i d e d i n t o 4 g r o u p s r a n d o ml y:t h e t a i l i n t r a v e n o u s i n j e c t i o n o f P BS( A g r o u p ), t h e t a i l i n t r a v e n o u s i n j e c t i o n o f 5 - FU g r o u p( B g r o u p ), t h e i n t r a t u mo r i n j e c t i o n o f 5 - F U g r o u p( C g r o u p );a n d t h e i mp l a n t o f s u s t a i n e d— r e l e a s e f l u o r o u r a c i l g r o u p( D g r o u p ) . Af t e r 1 5 d o f me d i c a t i o n, t h e t u mo r we i g h t a n d t

u mo r v o l u me we r e r e c o r d e d, t h e t u mo r i n h i b i t i n g r a t e s we r e c a l c u l a t e d . Th e t u mo r t i s s u e s we r e o b s e r v e d b y HE s t a i n i n g a n d d e t e c t e d t h e

e x p r e s s i o n o f c a s p a s e - 3 b y i mmu n o h i s t o c h e mi s t r y( I HC) . Re s u l t s S u s t a i n e d— r e l e a s e f l u o r o u r a c i l c o u l d s u p p r e s s t h e t r a n s p l a n t a t i o n t u mo r g r o wt h s i g n i f i c a n t l y, t h e t u mo r we i g h t a n d t u mo r v o l u me i n t h e D g r o u p h a d s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e s c o mp a r e d wi t h t h e A, B a n d C g r o u p s ( P ̄ 0 . 0 5 ), wh i c h c o u l d u p— r e g u l a t e d t h e e x p r e s s i o n o f e a s p a s e - 3, t h e d i f f e r e n c e s b e t we e n t h e D g r o u p wi t h t h e A, B a n d C g r o u p s( P< O . 0 5 ) . C o n c l u s i o n S u s t a i n e d - r e l e a s e f l u o r o u r a e i l c a n i n h i b i t t h e g r o wt h o f c o l o r e c t a l c a r c i n o ma t r a n s p 1 a n t a t i o n t u mo r mo r e e f f e c t i v e l y t h a n c o n v e n t i o n a l f l u o r o u r a c i l a n d u p— r e g u l a t e t h e e x p r e s s i o n o f c a s p a s e - 3, wh i c h p r o mp t s t h a t s u s t a i n e d

— r e— l e a s e f l u o r o u r a c i l ma y p l a y t h e a n t i— t u mo r r o l e b y i n d u c i n g t h e t u mo r c e l l a p o p t o s i s v i a a p o p t o s i s p a t h wa y . I t s d e f i n i t e t u mo r— i n h i b i— ing r e f f e c t de s e r v e s t o be p r o m ot e d i n c l i ni c a l c he m ot he r a py . Ke y wo r d s: e o l or e c t a l ne op l a s ms; s u s t a i ne d - r e l e a s e f l uor ou r ac i 1; c a s pa s e - 3

氟尿嘧啶至今仍是结直肠癌化疗的首选用药,其对结直肠

1 . 2试剂

R P MI一 1 6 4 0培养基及胎牛血清 ( Hy c l o n e公司);

癌有着确切的抑制作用。新型植入用缓释氟尿嘧啶是长效缓释抗肿瘤制剂,用其治疗恶性实体肿瘤对肿瘤预后有相当大的改善,其优势在临床已有相关报道 _ 1。]。本研究旨在观察氟尿嘧啶缓释剂对裸鼠结直肠癌 ( c o l o r e c t a l c a n c e r, C R C )移植瘤的抑制效果,以及验证其在抗结直肠癌方面的优势,以期能够进 一

兔抗人半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶一 3 ( c y s t e i n y l a s p a r t a t e s p e— c l f l c p r o t e a s e - 3, c a s p a s e 3 )多克隆抗体(北京中杉金桥生物

技术有限公司); 5 -氟尿嘧啶 ( 5 - F u)注射液 ( 2 5 mg/ mL,上海旭东海普药业有限公司 );氟尿嘧啶缓释制剂 (芜湖中人科技有 限公司,批号 2 0 0 1 0 8 2 6,每瓶 1 0 0 mg )。 1 . 3方法 1 . 3 . 1动物模型的建立细胞复苏、培养、传代,于细胞对数

步指导临床实践。

1材料与方法

1 . 1材料 B A L B/ c S P F级裸鼠 3 2只,雌性 1 5只,雄性 1 7

期收集细胞,做成浓度为 1 . 5×1 0的细胞悬液,裸鼠右前肢腋

下注射 0 . 2 mL细胞悬液 (细胞浓度为 3 . 0×1 0。个/只), 1 0 d 左右肿瘤长至直径约 5 mm为致瘤成功,将其分为 A组:磷酸

只, 4周龄,体质量 1 8~2 0 g,购于桂林医学院动物实验中心, 批号 S C X K桂 2 0 0 7— 0 0 0 1; L o V o细胞系购于广西医科大学。

* 基金项目:广西壮族自治区桂林市科技攻关与新产品试制科研基金 ( 2 0 1 1 0 1 1 9— 5 )。 作者简介:李弘( 1 9 7 0 ̄),主治医师,本科,主要从事 胃肠道肿瘤的防治方面的研究。

氟尿嘧啶缓释剂植入对人结直肠癌裸鼠移植瘤生长抑制的观察

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